ЦМК специальности Лабораторная диагностика

ПРИНЦИПЫ РАБОТЫ КОАГУЛОМЕТРОВ

Преподаватели ЦМК Лабораторная диагностика

Тарасова Л.В., Белова М.Н.

Механические коагулометры

Принцип работы механических коагулометров представлен на рис. 1. В одном из вариан­тов кювета с плазмой вращается в наклонном положении. Металлический шарик в кювете нач­нет вращаться при свертывании плазмы. Момент захвата шарика выпавшим сгустком и начало его вращения вместе с кюветой фиксируется магнит­ным датчиком. При других вариантах регистри­руется прекращение вращения внутри кюветы магнитной мешалки, захват сгустка опускаю­щимся в кювету крючком или иные схемы, ос­нованные на переходе жидкой плазмы в сгусток. Механические коагулометры характеризуются высокой надежностью и простотой в обслужи­вании. Кроме того, они могут работать с цель­ной кровью. Основные проблемы возникают в ситуациях, когда формируется неплотный сгус­ток, например при использовании гепарина. В этих случаях выпадающий фибрин часто не мо­жет сразу увлечь за собой механическое устрой­ство, результаты получаются плохо воспроизво­димыми. Другой проблемой является формиро­вание на шарике, мешалке или других устрой­ствах, погруженных в кювету, белковых конгло­мератов, которые мешают регистрации.

Оптико-механические коагулометры

Коагулометры этого класса характеризуют­ся способностью регистрировать выпадающие хлопья фибрина даже без формирования плотно­го сгустка, что бывает при приеме пациентами ан­тикоагулянтов, а также в случаях коагулопатий. Принцип оптико-механического коагулометра представлен на рис. 2. За счет использования следящей схемы регистрируется изменение пода­ваемого на лампу напряжения, чтобы обеспечи­вался заданный световой поток, проходящий че­рез кювету с образцом. В этом случае резко умень­шается влияние исходной плотности плазмы, ее иктеричности и липемичности, в принципе воз­можно исследовать свертывание плазмы с тром­боцитами.

Турбидиметрические коагулометры

Турбидиметрические коагулометры регис­трируют момент свертывания крови по приро­сту оптической плотности (рис. 3). При свер­тывании плазмы происходит резкое изменение светопропускания или рассеивания. В коагулометре программируется, при каком приросте оптической плотности по отношению к исход­ному уровню (ΔА) регистрируется момент свер­тывания. Время от внесения в оптическую кю­вету индуктора свертывания до момента дости­жения заданного ΔА определяется как время свертывания плазмы в исследуемом тесте. Турбидиметрический принцип используется при определении показателей свертывания плазмы на многофункциональных фотометрах и биохи­мических анализаторах. Фотометрический ка­нал при этом программируется по методу «вре­мя достижения фиксированной величины аб­сорбции». Программы для исследования гемо­стаза стали использовать даже на многофунк­циональных плашечных фотометрах, в которых свертывание плазмы исследуется на стриппах или планшетах.

Основными преимуществами оптических си­стем измерения являются:

1. Более точные результаты измерений при низ­ких показателях свертывания. Полностью исключена проблема «слабого сгустка».

2. Исключено загрязнение пробы, так как отсут­ствуют мешалки и другие механические компоненты.

3. Имеется возможность снижения объема про­бы, так как не нужно место под механичес­кие компоненты (мешалки), это важно, осо­бенно в педиатрии. Кроме того, уменьшает­ся расход реагентов.

4. Эргономичность и удобство работы.

Типичным представителем этого семейства приборов является оптический двухканальный коагулометр KG-1 производства компании «Согmау» (рис. 4).

Нефелометрические коагулометры

Нефелометрические коагулометры определя­ют момент образования сгустка по изменению рассеяния света. Новейшие разработки в этой области технологий нашли воплощение в коагулометрах фирмы «Sysmex» (Япония), в которых используется принцип определения сгустка по бо­ковому рассеиванию света (рис. 5). Метод рас­сеивания обеспечивает высокое качество анали­зов - высокую специфичность и чувствительность метода детекции сгустка даже для сложной липемичной или иктеричной плазмы.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Рис. 1. Принцип работы механического коагулометра. Кювета с плазмой расположена под наклоном и вра­щается, шарик стоит на месте, не вращается. В момент свертывания шарик захватывается сгустком; как только шарик уходит от датчика, меняется магнитное поле, при­бор регистрирует момент свертывания плазмы

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Рис. 2. Принцип регистрации выпадающего фибрина оптико-механическим коагулометром. Выпавшие в кювете нити фибрина меняют световой поток, падающий на фото­диод. Фотодиод связан через следящую схему компенса­ции с напряжением на лампе. В результате на лампу пода­ется такое напряжение, которое меняет яркость свечения лампы, чтобы световой поток, попадающий на светодиод, поддерживался в заданном диапазоне. По изменению на­пряжения на лампе регистрируется начало выпадения фибринового сгустка

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Рис. 3. Принцип регистрации момента образования сгустка турбидиметрическим коагулометром. При свер­тывании плазмы происходит резкое увеличение оптичес­кой плотности в фотометрической ячейке. Коагулометр определяет время от внесения активатора свертывания до момента изменения оптической плотности на ДА (напри­мер, на 0,1 ед. оптической плотности).

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Рис. 4. Оптический двухканальный коагулометр KG-1 производства компании «Соrmау». Точность результатов повышается за счет синхронизации времени попадания ре­агента в измерительную кювету и запуска отсчета времени, а также исключения из применения магнитных мешалок в измерительных кюветах, Прибор эргономичен, термостат для проб и реагентов размещен в самом приборе, у кювет есть перемычки и держатели для удобства переноса из термо­стата в измерительные ячейки. Работа на приборе эконом­на, так как снижен расход реагентов за счет уменьшения объема кювет, использования многоразовых кювет.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Рис. 5. Нефелометрический принцип измерения све­торассеяния, заложенный в основу определения момен­та выпадения сгустка на коагулометрах фирмы «Sysmex» (Япония). Метод позволяет повысить точность измерений и их воспроизводимость до 2-3%, а также снизить влияние на результат самого образца. Анализаторы работают на любых реагентах (в том числе на российских).

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Долгов В.В., Свирин П.В.  Лабораторная диагностика нарушений гемостаза. - М.-Тверь: ООО «Издательство «Триада», 2005. -227 с

Февраль 2016